慢病毒（ Lentivirus ）载体是以 HIV-1 （人类免疫缺陷I 型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。 区别一般的 逆转录病毒载体 ，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。基本概述慢病毒载体 的研究发展得很快， 研究的也非常深入。 该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上， 从而达到持久性表达。 在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞，从而达到良好的的基因治疗效果，在美国已经开展了临床研究， 效果非常理想，因此具有广阔的应用前景。慢病毒的应用目前慢病毒也被广泛地应用于表达RNAi 的研究中。由于有些类型细胞脂质体转染效果差，转移到细胞内的siRNA 半衰期短，体外合成siRNA 对基因表达的抑制作用通常是短暂的， 因而使其应用受到较大的限制。 采用事先在体外构建能够表达 siRNA 的载体 , 然后转移到细胞内转录siRNA 的策略，不但使脂质体有效转染的细胞种类增加，而且对基因表达抑制效果也不逊色于体外合成siRNA ，在长期稳定表达载体的细胞中， 甚至可以发挥长期阻断基因表达的作用。在所构建的 siRNA 表达载体中，是由 RNA 聚合酶 Ⅲ启动子来指导RNA 合成的，这是因为 RNA 聚合酶Ⅲ有明确的起始和终止序列， 而且合成的 RNA 不会带 poly A 尾。当 RNA 聚合酶Ⅲ遇到连续4 个或 5 个 T 时，它指导的转录就会停止，在转录产物 3’端形成 1~4 个 U。U6 和 H1 RNA 启动子是两种 RNA 聚合酶Ⅲ依赖的启动子，其特点是启动子自身元素均位于转录区的上游，适合于表达～21ntRNA 和～ 50ntRNA 茎环结构（ stem loop）。在 siRNA 表达载体中，构成siRNA 的正义与反义链，可由各自的启动子分别转录,然后两条链互补结合形成siRNA ；也可由载体直接表达小发卡状RNA(small hairpin RNA, shRNA), 载体包含位于 RNA 聚合酶Ⅲ启动子和4～5T 转录终止位点之间的茎环结构序列，转录后即可折叠成具有1~4 个 U 3 ’ 突出端的茎环结构，在细胞内进一步加工成siRNA 。构建载体前通常要通过合成siRNA 的方法，寻找高效的siRNA ，然后从中挑选符合载体要求的序列，将其引入siRNA 表达载体。慢病毒载体慢病毒载体（ Lentiviral vector ）较逆转录病毒载体 有更广的宿主范围，慢病毒能够有效感染非周期性和有丝分裂后的细胞。慢病毒载体能够产生表达shRNA 的高滴度的慢病毒，在周期性和非周期性...
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