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DNA重组技术的基本工具VIP免费

DNA重组技术的基本工具_第1页
DNA重组技术的基本工具_第2页
DNA重组技术的基本工具_第3页
专题1基因工程§1-1DNA重组技术的基本工具设想?能否培养出具有抗虫性状的抗虫棉呢?基因工程的概念基因工程的概念基因工程基因工程::指按照人们的愿望指按照人们的愿望,,进行严格的设进行严格的设计并通过计并通过体外体外DNADNA重组重组和和转基因转基因等技术,赋予等技术,赋予生物以新的遗传特性生物以新的遗传特性,,创造创造出更出更符合人们需要符合人们需要的新的的新的生物类型生物类型和和生物产品生物产品。由于基因工程是。由于基因工程是在在DNADNA分子水平分子水平上进行设计和施工的,因此又上进行设计和施工的,因此又叫作叫作DNADNA重组技术或基因拼接技术。重组技术或基因拼接技术。基因工程的别名基因工程的别名操作环境操作环境操作对象操作对象操作水平操作水平基本过程基本过程原理原理目的目的基因拼接技术或基因拼接技术或DNADNA重组技重组技术术生物体外生物体外基因基因DNADNA分子水平分子水平定向改造生物的遗传性状定向改造生物的遗传性状剪切剪切→→拼接拼接→→导入导入→→表达表达基因重组基因重组基因工程的概念理解基因工程的概念理解基因工程培育抗虫棉的简要过程:基因工程培育抗虫棉的简要过程:苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌提取提取抗虫基因抗虫基因普通棉花普通棉花((无抗虫特无抗虫特性性))棉花细胞棉花细胞((含抗虫基含抗虫基因因))与载体与载体DNADNA拼接,导入拼接,导入棉花植株棉花植株((有抗虫特有抗虫特性性))表达表达•基因工程培育抗虫棉的关键步骤:基因工程培育抗虫棉的关键步骤:关键步骤一:关键步骤一:抗虫基因从苏云金芽孢杆菌抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内细胞内提取出来提取出来关键步骤二:关键步骤二:抗虫基因抗虫基因与棉花与棉花DNA“DNA“缝缝合”合”关键步骤三:关键步骤三:抗虫基因抗虫基因进入棉花细胞进入棉花细胞•解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具?解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具?““分子手术刀”分子手术刀”————限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶““分子缝合针”分子缝合针”————DNADNA连接酶连接酶““分子运输车”分子运输车”————基因进入受体细胞的基因进入受体细胞的载体载体§1-1DNA重组技术的基本工具“分子手术刀”──限制酶“分子缝合针”──DNA连接酶“分子运输车”──基因进入受体细胞的载体识别双链识别双链DNADNA分子的某种特定的核苷酸分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。主要从原核生物分离纯化出来主要从原核生物分离纯化出来40004000种。种。11、来源:、来源:22、种类:、种类:33、作用:、作用:55、结果:、结果:形成两种末端形成两种末端一、“分子手术刀”一、“分子手术刀”————限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶黏性末端平末端4、切割方式:错位切和平切ATGCATGC限制酶切割磷酸二酯键限制性内切酶作用过程点击播放点击播放1、大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开形成黏性末端。2、SmaⅠ能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切割形成平末端。常见的两种限制酶SmaⅠSmaⅠ平末端平末端平末端平末端EcoRⅠEcoRⅠ黏性末端黏性末端•什么叫黏性末端?什么叫黏性末端?当限制酶从识别序列的当限制酶从识别序列的中心轴线两侧中心轴线两侧切开时切开时,,被限制酶切开的被限制酶切开的DNADNA两条单链两条单链的切口,带有几个的切口,带有几个伸出的核苷酸伸出的核苷酸,他们之,他们之间正好间正好互补配对互补配对,这样的切口叫,这样的切口叫黏性末端黏性末端。。什么叫平末端?什么叫平末端?当限制酶从识别序列的当限制酶从识别序列的中心轴线处切中心轴线处切开时开时,切开的,切开的DNADNA两条单链的切口,是两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平整的,这样的切口叫平末端平末端。。基因的针线:DNA连接酶GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCG用同种限制酶切割ATGCATGC连接酶连接磷酸二酯键DNA连接酶的作用过程:二、分子缝合针——DNA连接酶T...

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