精品文档土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（一）主讲：黄冈中学优秀生物教师王小敏课题背景：、尿素的利用尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。、细菌利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶+眠酶 I +、常见的分解尿素的微生物芽抱杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽抱杆菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。、课题目的① 从土壤中分离出能够分解尿素的细菌。② 统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。一、研究思路（一）筛选菌株、实例：多聚酶链式反应（是一种在体外将少量大量复制的技术,此项技术要求使用耐高温（°C）的聚合酶。该酶存在于水生嗜热菌（中。精品文档问题：为什么细菌能从热泉中被筛选出来呢？原因：因为热泉温度〜°C,淘汰了绝大多数微生物只有细菌被筛选出来。启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。、实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、等，同时抑制或阻止其他微生物生长。要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；方法：()抑制大多数微生物不能生长；()造成有利于该菌生长的环境。结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：葡萄糖尿素琼脂①从物理性质看此培养基属于哪类？固体培养基精品文档②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？碳源：葡萄糖、尿素氮源：尿素、培养基选择分解尿素的微生物的原理培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。（二）统计菌落数目计数法：直接计数法、平板计数法、比浊法、膜过滤法、直接计数法：最常用的显微镜直接计数法显微镜直接计数：先将待测样品制成悬液，利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。缺点：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；需要相对高的细菌浓度；个体小的细菌在显微镜下难以观察；、间接计数法（活菌计数法）（）原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单...
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